Guía práctica de inmovilización para las distintas especies

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Reproducción de la rata

Características generales
Poseen un vida media de 2 años siendo sexualmente maduro entre 60-90 días de edad. La gestación de la hembra dura 21 días promedio con 8 a 12 nidadas por año. Cada nidada posee de 8 a 12 individuos.

Características reproductivas de la hembra
Las hembras de esta especie son poliéstricas continuas, anatómicamente tienen similitudes con el aparato reproductor del ratón. Con respecto al útero, tienen el útero bicorne con la peculiaridad que poseen 2 cuellos uterinos, uno para cada cuerno, comunicados entre sí por una sola vagina. Las glándulas mamarias son 12, distribuidas en 6 en el tórax y 6 en el abdomen, son 6 pares de pezones . Las hembras nacen con el canal vaginal cerrado, éste recién se abre a los 72 días de vida con un rango de 34-109 días, esta variación está influída por factores nutricionales, genéticos y ambientales. El primer estro se da a los 40-75 días pero recién se cubre a los 90 días ya que el cruce temprano produce partos más espaciados, distocias en el parto, neonatos de menor peso y tamaño, estas condiciones se dan también cuando el cruce es tardío, la edad de mayor fertilidad es de 100-300 días y el ultimo celo se da a los 12-18 meses.

Características reproductivas del macho
Una de las diferencias resaltantes entre los ratones y las ratas es que las ratas pueden vivir entre machos sin que éstos se peleen, algo que en ratones es imposible. El descenso testicular se da de 15-50 días , la madurez sexual del macho ocurre a los 40-60 días con un peso fluctuante entre 100-140 gramos, es importante tener en cuenta que la madurez sexual del macho implica también una mejora en calidad y viabilidad de los espermatozoides. El comportamiento precopulatorio es característico, hay mordisqueo de la cabeza y cuerpo de la hembra por parte del macho, o bien éste realizará un examen de la región ano genital de la hembra, el tiempo de eyaculación va de 10-20 segundos, los espermatozoides tienen forma alargada y con la cabeza en forma de gancho.

Sexado
El sexado de los neonatos es muy simple, se mide la distancia ano genital que en machos es aproximadamente el doble que en las hembras.

Ciclo estral
Las ratas son poliéstricas continuas, el ciclo estral en esta especie dura de 4 -6 días, los ciclos más comunes son los de 4 días, los ciclos más largos son excepciones. Los factores ambientales pueden producir variaciones en el desarrollo normal de los ciclos, estos factores como horas luz, temperatura y humedad ambiental producen variaciones en las concentraciones de estradiol circulante. Las ratas son más propensas a presentar pseudopreñez ya que presentan índices altos de fertilidad y el período de receptividad es más largo, en promedio la pseudopreñez dura 13 días.
Fases del ciclo estral:
• Proestro: El Proestro dura aproximadamente 12 horas, en esta etapa el pH vaginal es de 5.4, la vagina se torna seca y se comienza a producir la cornificación de las células de las paredes de ésta, los ovarios están en plena producción folicular. El diámetro de la luz uterina es de 5 mm.
• Estro: Dura de 9 -15 horas, la vagina se ve cornificada y seca, el pH vaginal es de 4.2 y aparece un flujo vaginal abundante y caseoso. Los estrógenos circulantes provocan cambios en el útero y aparece el deseo de apareamiento, aumenta la producción de FSH y LH en los 2 días siguientes. El estro se caracteriza por cambios conductuales en el animal, se ve que la rata corre más que de costumbre, sacude las orejas y en presencia de otra rata presenta lordosis. La ovulación ocurre 8 -11 horas después de la aparición del estro.
• Metaestro: Se divide en 2 etapas. El metaestro I que dura 15 horas, se produce el pico de LH y la consecuente ovulación múltiple y espontánea, este pico esta relacionado con las horas luz que recibe el animal, si recibe 12 horas de luz al día y una temperatura ambiente de 20 -22 ºC se verá favorecida la función reproductiva. El pico de LH determina el final de la producción de estrógenos y comienzo de la producción de progesterona por los cuerpos lúteos, la progesterona determinará el comportamiento materno de la rata. El metaestro II dura 6 horas, en esta etapa la vagina se ve húmeda y los óvulos liberados se encuentran en el oviducto.
• Diestro: Dura 57 horas. El pH vaginal es de 6.1, el diámetro de la luz uterina es de 2.5 mm, los cuerpos lúteos producen abundante progesterona que desbloquea la producción de FSH y LH, esto inicia nuevamente el ciclo con el desarrollo de nuevos folículos.

Cópula
Se produce en el estro, está influido por feromonas que se encuentran en la orina del macho intacto ya que en la orina de machos castrados o prepúberes no se haya esta feromona. Antes de la copula el macho realiza una inspección de la región ano genital de la hembra, el macho monta a la hembra y realiza movimientos pélvicos rápidos, el semen es depositado en la vagina, en la entrada de la cerviz, el semen depositado contiene una secreción que forma un tapón vaginal para que el semen depositado no salga de la vagina. El estímulo de la copula produce contracciones en el útero y oviductos, en un primer momento las contracciones son fuertes lo que provoca la inactivación de los espermatozoides que llegaron primero a las ampollas, posteriormente las contracciones son suaves y recién allí es cuando llegan los espermatozoides con capacidad reproductiva íntegra al oviducto para que se lleve a cabo la fecundación de los óvulos allí presentes. Estas contracciones están reguladas por los estrógenos circulantes en la hembra.

Gestación y parto
La gestación dura 20- 22 días, la placenta es discoidea y hemocorial. El crecimiento de los cuernos uterinos recién se hace visible a los 13 días de gestación, los embriones se disponen de manera uniforme en ambos cuernos uterinos y se separan por una distancia razonable para permitir el desarrollo individual de cada individuo.
Nacen en promedio de 8 a 12 crías por parto, la cantidad de crías, la edad de la madre y sus condiciones físicas determinan el tiempo del parto, la distocia se presenta en hembras con niveles séricos bajos de vitamina A, esto también esta relacionado con el número de crías que nacerán. De 1.5 a 4 horas antes de la expulsión de la primera cría se produce la salida de un líquido transparente por la vulva, la hembra se ve más inquieta y con estiramientos de vez en cuando; las contracciones uterinas intensas producen dolor abdominal que obligan al animal a ponerse en posición decúbito abdominal y a estirar las patas del tren posterior. La placenta es devorada de inmediato por la madre que ayuda con los dientes a la salida de la cría de la bolsa, así la madre estimula a la cría, lo lame y limpia para eliminar el contenido líquido de las vías respiratorias del recién nacido. Los recién nacidos tienen un peso de 4-6 gramos, nacen sin pelo, sordos, ciegos y desvalidos.


Lactación
La inmunidad pasiva que da la madre al hijo se da por 2 vías, la primera es mediante el saco vitelino y la segunda por el calostro. La composición de la leche de la rata es:
- Proteínas: 7- 12 %
- Azucares: 3 -3.5 %
- Grasa: 10 -15 %
- Agua: 70 -74 %
Las hembras aptas para la lactación producen 2 feromonas para la atracción de la cría, la primera es producida en el ciego de la madre y sale por las heces de la misma, la segunda se produce en la piel del abdomen y esta estimula a las crías para que mamen del pezón de la madre. El destete se da a los 20 días posparto y las crías presentan ya un peso entre 30 y 40 gramos. En las ratas se presenta el celo posparto fértil que está determinado por el número de crías en lactancia y el fotoperíodo que se le dé a la hembra. Es posible ver hembras que están gestando mientras dan de lactar.

Reproducción del ratón

GENERALIDADES:
Los pequeños roedores del laboratorio pueden ser considerados animales de alta producción, según el sistema de apareamiento que se utilice.
En bioterios de producción intensiva se hallan en apareamiento permanente.
La hembra se encuentra gestando y amamantando simultáneamente.
Las condiciones del medio ambiente, la dieta que consumen y las características genéticas y condiciones sanitarias de las especies determina el comportamiento en la reproducción.
La respuesta biológica está condicionada por el medio ambiente, si este no es estable la respuesta tampoco lo será.
Clasificación reproductora: Hembra poliéstrica contínua
Pubertad: a las 4 semanas de vida coincidiendo con la mayor secreción de gonadotropinas
Gran variabilidad entre las distintas cepas debido al control genético, las condiciones ambientales y sociales.
Hembras inmaduras en contacto con machos adultos o con la orina de éstos, se acelera el inicio de la pubertad.
El contacto con hembras adultas o su orina retarda el ritmo de crecimiento, la apertura vaginal y la aparición del primer estro .
Estos efectos se deben a la acción de feromonas presentes en la orina de machos y hembras.

CICLO ESTRAL
Duración del ciclo: varía de 4 a 6 días en animales con 14 horas de luz / 10 horas de oscuridad. El adecuado manejo de los ciclos de luz/oscuridad sirve para sincronizar celos. Permite que el apareamiento y la ovulación se acomoden a las necesidades del investigador
Se divide en proestro, estro, metaestro y diestro acompañando de cambios de la citología vaginal.
El celo dura 12 horas aproximadamente.
El proestro y el estro culminan en la ovulación y constituyen la liberación de estrógenos.
El metaestro y diestro conforman la fase progestacional o luteal.
Pico ovulatorio de LH se produce entre las 4 y 5 de la tarde del día del proestro y la ovulación 12 horas después.
La cantidad de óvulos liberados en cada ciclo esta ligada a factores genéticos, variando entre las diferentes cepas.
Durante el proestro se observan niveles máximos de FSH (algunos autores dicen que estimula el desarrollo de folículos que madurarán y ovularán en el próximo ciclo)
Los óvulos liberados son transportados a la porción proximal del oviducto donde tiene lugar la fecundación.
Mantiene su fertilidad durante 10/15 horas.

EFECTO BRUCE
Es el bloqueo de la preñez, si durante la etapa previa a la implantación la hembra es expuesta a un macho extraño o sus feromonas.
Si la hembra es separada del macho con el que se aparea (aproximadamente 6 horas) y retorna con el mismo macho, el bloqueo se produce como si fuera un extraño.
Se necesita que ambos convivan 4-6 horas para que la hembra reconozca a las feromonas masculinas.
La memoria olfativa se halla en el bulbo olfatorio perdura 30-50 días.
El neurotransmisor es la noradrenalina.
El reconocimiento de las feromonas es función del órgano vomeronasal.

EFECTO WHITTEN
Las influencias sociales son notorias durante la duración del ciclo, pseudopreñez
La hembra aislada presenta ciclos de 5-6 días de duración irregulares y pseudopreñez espontánea.
Cuando se agrupan hembras sin machos presentan pseudopreñez.
Whitten sugirió que se inhibe la liberación de FSH y aumenta la LH, situación que lleva a la pseudopreñez.
Las hembras aisladas cuando son llevadas con machos normales presentan ciclos con regularidad.
Este efecto del macho sobre el ciclo es inducido por una feromona andrógeno-dependiente que se agrega a la orina dentro de la vejiga y también en la salida al exterior por la secreción de las glándulas prepuciales.

CÓPULA Y FERTILIZACIÓN
El apareamiento se produce en el estro, durante el período de oscuridad.
La receptividad abarca parte del proestro y metaestro.
Machos dominantes obligan a las hembras a copular fuera del período fisiológico, estos apareamientos son estériles.
En la vagina se ve la presencia del tapón vaginal luego de la cópula.
La eyaculación es intrauterina.
Los espermatozoides pueden fecundar durante 6 horas y la motilidad remanente es de 14 horas,
Son eliminados por fagocitosis leucocitaria 24 horas después de la cópula.

GESTACIÓN
Duración es de 19 a 20 días según la cepa.
La preñez esta relacionada con el tamaño de la masa fetal y no con la cantidad de crías.
En el apareamiento permanente es habitual el celo posparto que aparece entre las 16 y 24 horas después del parto
Si la hembra es fecundad en la lactación comienza a gestar poco después del parto.
Cuando son más de 3 crías en la lactación se produce un retardo en la implantación por inhibición que ejerce la lactancia sobre la secreción de las gonadotropinas.
Esto conduce a que se prolongue la duración de la gestación.
La placenta es discoidea y hemocorial (el tipo de fijación es en una única área circular)

PSEUDOPREÑEZ
La duración es entre 10-13 días, o puede durar una preñez normal (dependerá de factores como la edad de la hembra).
Resulta de cópulas estériles, o aparece en hembras aisladas o agrupadas entre sí.
La progesterona en los primeros días es segregada del mismo modo que en la preñez.
En los días 7 y 8 se produce la regresión de los cuerpos luteos y desciende la progesterona.

PARTO
Algunos autores señalan que la mayoría de los nacimientos se produce en las horas de oscuridad.
Relaxina y oxitocina intervienen en el parto.
Relaxina: Día 13 de gestación. Favorece movimiento y separación de la sínfisis pubiana.
Oxitocina: hay discrepancias como determinante de la expulsión de los fetos.
El primer feto sale del cuerno derecho, los otros son expulsados al azar.

LACTACIÓN
Dura 21 días.
Puede prologongarse si se reemplaza la camada por otros animales más pequeños con succión intensa.
Máximos niveles de secreción láctea 12-13 días posparto.
El reflejo de expulsión de la leche, cuyo estímulo es la succión de pezones es necesario no solo para la liberación de la oxitocina sino también para la secreción de hormonas de la hipófisis anterior, responsables del mantenimiento de la secreción láctea.
El complejo lactogénico esta constituido por la prolactina y ACTH.
La STH tiene importancia lactogénica en algunas cepas.
Conductos mamarios para su crecimiento y proliferación requiere la acción de estrógenos:
STH (somatotropina)
ACTH (adrenocorticotropina)
El crecimiento lóbulo-alveolar es estimulado por los estrógenos STH ACTH prolactina progesterona.